La hormona del crecimiento humano (somatropina) se utiliza ampliamente fuera de las situaciones médicas comunes. Por ejemplo, en el culturismo se toma para aumentar la masa muscular y disminuir la grasa corporal.
Al estar tan lejos de las manos de los distribuidores farmacéuticos legítimos, los médicos y los farmacéuticos, los preparados de origen dudoso y de baja calidad suelen llegar al mercado negro.
En los últimos años se han localizado y analizado somatropinas falsificadas, contaminadas y de muy mala calidad, tanto en la Unión Europea como en los Estados Unidos.
Se encontraron muchos preparados falsificados, algunos de los cuales, en lugar de la esperada hormona de crecimiento recombinante rhGH, contenían la hormona del embarazo HCG.
Otros preparados ilegales contenían la hormona de crecimiento de cadáveres humanos (glándulas pituitarias), variantes de somatropina veterinaria, vitaminas, insulina, etc.
Al observar los más de 50 casos comprobados de transmisión de la enfermedad de Creutzfeldt Jakob por preparados contaminados de hormona de crecimiento, principalmente durante la década de 1980 [1-4], creemos que se debe advertir urgentemente a la gente antes de utilizar preparados cuestionables de hormona de crecimiento [5-9].
En este artículo se examinarán de cerca las diversas técnicas de fabricación utilizadas para elaborar los medicamentos de la hormona de crecimiento, poniendo un fuerte énfasis en cómo identificar los preparados de calidad de los de naturaleza más cuestionable.
La biosíntesis de la hormona del crecimiento
Antes de entrar en la fabricación de drogas GH, es importante entender cómo el cuerpo produce esta hormona.
La hormona de crecimiento humano somatropina (hGH) es una hormona proteínica con una longitud de cadena de 191 aminoácidos y una masa molecular de aproximadamente 22 kD.
La estructura de la proteína en el período terciario se estabiliza por medio de dos puentes de disulfuro (fig. 1)
La síntesis y liberación endógena de la hormona de crecimiento tiene lugar en la glándula pituitaria, bajo el control de las hormonas peptídicas del hipotálamo.
La somatropina endógena se sintetiza primero como una hormona precursora de 217 aminoácidos en longitud. Durante la secreción, un péptido de señal con 26 aminoácidos se empalma de la hormona, produciendo la molécula activa GH [10].
El gen diana de la hormona de crecimiento humano cubre cinco secciones codificantes de las transcripciones primarias que se eliminan durante su tratamiento posterior [11].
.En la mayoría de los casos, el resultado es un ARNm para la hormona de crecimiento completa con una longitud de cadena de 191 aminoácidos y una masa de aproximadamente 22 kD (22-kD hGH). Sin embargo, una cierta porción de ARNm está sujeta a un proceso de empalme alternativo.
Desarrolla, entre otras cosas, una variante acortada de 45 nucleótidos de ARNm, que después de ser traducida en esas secuencias de proteínas apropiadas, da lugar a una variante de la hormona de crecimiento en la que faltan los aminoácidos en posición 32-46.
La resultante 20 kDhGH no se forma durante la fabricación genética, que se basa en el gen ya correctamente empalmado. Por lo tanto, puede utilizarse como marcador para identificar los preparados de hormona de crecimiento tomados de la hipófisis humana [11-12].
Hormona de crecimiento de cadáveres
Antes de la introducción de los métodos genéticos de fabricación de proteínas recombinantes, la hormona de crecimiento humano se obtenía extrayéndola de las pituitarias de los cadáveres.
Debido al riesgo de transmisión de enfermedades infecciosas como el raro trastorno neurológico de Creutzfeldt-Jakob [1 -4], y otras enfermedades infecciosas como la hepatitis B y C, los preparados de hormona de crecimiento extraídos de la pituitaria humana fueron retirados del mercado de la Unión Europea a mediados de los años 80 [17].
Después de ese momento, sólo los preparados de hormona de crecimiento (sintéticos) producidos genéticamente han sido legales en la UE.
Los preparados de hormona de crecimiento fabricados con pituitarias de cadáveres humanos siguen estando disponibles en el mercado negro de Europa. Si un atleta utiliza esos preparados, debe comprender que existe un riesgo de transmisión de enfermedades.
Dado que los riesgos de un medicamento no siempre se revelan en el ámbito de las drogas clandestinas, puede permitirse que un precio ligeramente inferior sea el factor decisivo para adquirir un producto biológico de GH de riesgo. No obstante, advertimos urgentemente contra el uso de tales preparados.
Tecnología del cuerpo de inclusión/Somatrem
Los ensayos clínicos con la hormona de crecimiento humano sintética comenzaron a principios del decenio de 1980. Uno de los primeros productos certificados en los EE.UU. en esos años fue Protropin’ de Genentech Inc.
Este producto se diferencia de los remedios de GH más populares de hoy en día como Nutropin, Saizen y Humatrope, en que contiene somatrem en lugar de somatropina.
El somatrem es una proteína GH sintética que contiene un aminoácido de metionina adicional, que ha sido añadido a la secuencia de iniciación de 24 aminoácidos.
La hormona de crecimiento humano natural (endógena) es un polipéptido que contiene 191 aminoácidos.
El proceso biosintético utilizado para hacer el somatrem, también llamado Proceso de Inclusión Corporal, implica la síntesis química del fragmento de ADN que codifica los primeros 24 aminoácidos.
Los residuos de aminoácidos restantes se obtienen haciendo copias complementarias de ADN del ARN mensajero preparado a partir de células pituitarias humanas.
Toda la secuencia de ADN se introduce en una bacteria, escherichia coli (E.coli), que luego es capaz de sintetizar la proteína GH. Somatrem, conocida químicamente como MethGH o N-metionil-hGH, se creía que era igual a la hormona de crecimiento endógena (con 191 aminoácidos) en todos los aspectos.
Esto se debía quizás sólo a que la comparaban con la hormona de crecimiento biológica (de cadáveres), que no era pura, y contenía contaminantes que producían efectos secundarios en muchos usuarios.
Cuando los científicos finalmente lograron producir la proteína correcta de la hormona de crecimiento humana con 191 aminoácidos (mediante la tecnología de secreción), inmediatamente notaron la diferencia.
Resultó que el aminoácido extra hacía que el cuerpo pensara que estaba siendo invadido por un cuerpo extraño, y a su vez hacía que produjera anticuerpos contra esta hormona en muchos usuarios.
Esto llevó a reacciones alérgicas, y a veces los anticuerpos son tan prominentes que incluso neutralizaron el efecto de la hormona administrada.
Se observaron anticuerpos en aproximadamente el 50% de los jóvenes usuarios en un experimento clínico [41], y un segundo experimento británico calificó la respuesta aún más alta, en el 80% de los usuarios [42]. Sin embargo, los anticuerpos no tuvieron ningún efecto secundario grave que señalar.
El año pasado hubo un artículo sobre un joven usuario que tomaba Met-hGH y dejó de crecer. Los médicos dejaron de administrar el Met-hGh, y después de una pausa de siete meses, comenzaron el tratamiento con rhGH (191 aminoácidos), y el crecimiento se reanudó [43].
Si se usa somatrem, esta forma de GH debe mantenerse a 2-8° C para mantener la estabilidad.
Tecnología de Secreción de Proteínas y Fabricación de Células de Ratón
La tecnología de secreción de proteínas es una alternativa mejorada a la producción en e-coli, en la que la rhGh se secreta en un medio de producción libre de proteínas.
La fabricación de una proteína recombinante como la hormona de crecimiento humano por secreción se realiza añadiendo un líder de secuencia secretoria (normalmente una secuencia de una citoquina) en el n-terminal (nitrogenterminal) de la cadena de aminoácidos de la hormona de crecimiento.
Esto permite que la proteína recombinante sea secretada, facilitando un proceso de purificación más simple, y evitando la resolubización de los cuerpos de inclusión y el redoblamiento de la proteína.
La tecnología de secreción de la proteína conduce a la eliminación completa del residuo de aminoácidos n-terminal en las proteínas sintetizadas, lo que supone un problema en la producción con E. coli (Cuerpo de Inclusión). Una excepción es el preparado Saizen® de Ares-Serono, que se produce con el uso de material de células de ratón C127.
Debido a la fabricación genética controlada, no hay riesgo de que los pacientes se infecten con la ECJ con las tecnologías de secreción de proteínas, cuerpo de inclusión o fabricación de células de ratón.
En la actualidad, los únicos preparados de hormona de crecimiento permitidos para uso terapéutico en el mercado regular de medicamentos de la U.E. provienen de las firmas Lilly (Humatrope®), Pharmacia (Genotropin®), NovoNordisk (Norditropin®), Ferring (Zomacton®) y Ares-Serono (Saizen®).
Estos preparados contienen hGH producida genéticamente, idéntica en estructura a la proteína de la hormona de crecimiento humana correcta con una masa de aproximadamente 22 kD (r-hGH).
Están permitidos para el tratamiento de niños de baja estatura, antes de la terminación de su fase de crecimiento normal, y/o para la terapia de reemplazo en adultos con deficiencia de hormona de crecimiento.
La calidad se garantiza a través de los procedimientos y la fabricación controlada de las condiciones GMP. ¿Por qué es importante la forma en que se fabrica y se purifica la rhGh? Porque la rhGH es una molécula de proteína muy grande y frágil, que se dobla y se retuerce cuidadosamente sobre sí misma.
La actividad del cuerpo depende de los altamente frágiles enlaces cruzados entre las ramas de la proteína, que la mantienen en una configuración tridimensional exacta. Funciona en los receptores celulares sólo cuando esta configuración de llave específicamente orientada se ajusta a la cerradura de su sitio receptor específico.
Cualquier cambio en la forma puede bloquear su actividad biológica. Es por eso que una fabricación apropiada, purificación y redoblamiento de la somatropina son tan importantes.
Otra ventaja a señalar, es que la hormona de crecimiento fabricada a través de la tecnología de secreción es muy estable, y puede ser enviada a temperaturas de 37° Celsius o 98° Fahrenheit.
La antigua tecnología de fabricación de cuerpos de inclusión, como la utilizada para fabricar Protropina, requiere que la hormona se mantenga a 2-8°C, lo que significa que el envío debe hacerse con hielo seco, y el producto debe mantenerse refrigerado en todo otro momento. Y todos sabemos que, con las drogas del mercado negro, no siempre es así.
Reacciones Inmugénicas y Anticuerpos (GH-AB)
Las ronchas rojas, los puntos de inyección dolorosos y el aumento de la temperatura del lugar son indicativos de una respuesta inmunológica a las inyecciones de GH. Esto podría ser causado por la proteína bacteriana residual de los cuerpos de inclusión, pero también es muy posible que sea causado por el somatrem.
El aminoácido adicional, metionina, es suficiente para que el sistema inmunológico lo reconozca como una proteína extraña en el 50-80% de los usuarios en estos estudios [41-42]. En el peor de los casos, esto puede llevar a una respuesta inmune contra todas las formas de hGH incluyendo la GH endógena, una especie de respuesta autoinmune.
Si el sistema inmunológico reconoce una variante como Met-somatropina o des-phe1-somatropina como extraña, y comienza una respuesta inmune a ella, existe la posibilidad de que los anticuerpos también se vuelvan contra la hormona de crecimiento endógena.
Esto se debe a que, aparte del aminoácido extra o faltante, el resto de la secuencia de la hormona de crecimiento es idéntica a la hormona de crecimiento endógena.
En cuanto a la fuente de los anticuerpos de la GH, este estudio [44] sugiere que la inmunogenicidad no se debió a las impurezas de la proteína n-terminal metionina o e. coli, sino que probablemente fue causada por pequeñas cantidades de hormona de crecimiento con sutiles alteraciones estructurales cuya vida sigue siendo desconocida.
Este estudio [45] confirma la alta inmunogenicidad de Met-somatropina, especialmente en los pacientes no tratados anteriormente con rhGH.Una vez presente, el GH-AB sigue siendo detectable durante todo el período de tratamiento con Met-somatropina, sin embargo, después de dejar de met-rhGH, o cambiar a 22kD-rhGH, el GH-AB desapareció rápidamente en la mayoría de los pacientes.
Análisis de la marca
En los años 1996 a 1998 se analizaron muestras de prueba de Somatogen-L® y se observaron por primera vez desviaciones de la auténtica hormona de crecimiento en el mapa de péptidos.
Tras el desmantelamiento enzimático de la proteína mediante la tripsina y la separación cromatográfica de los fragmentos, se observó que en las muestras de Somatogen-L® se observaba un patrón de pico diferente en comparación con la sustancia de referencia.
La prueba de identidad mediante HPLC de fase inversa (prueba de identidad del marcador de medicamentos) reveló varios picos con diferentes tiempos de retención en comparación con la sustancia de referencia somatropina.
En cuanto a los tiempos de retención de somatropina correctos esperados, no apareció ningún pico. La masa molecular se determinó mediante LCMS con ionización de electroespray (ESI), y arrojó un valor inferior al de la sustancia de referencia.
La diferencia de masa medida fue de 147 D, que se correspondía exactamente con la masa de una fenilalanina en la cadena peptídica.
Dado que tanto el N-terminal como el C-terminal de la cadena somatropina comienza con la fenilalanina [13], y dentro de la cadena peptídica hay también varios bloques de construcción de la fenilalanina, se requirió una secuenciación para determinar la posición exacta de la supresión.
Afortunadamente, la secuenciación del N-terminal entregó la información adicional necesaria. Resultó que el agente activo de los preparados examinados era des-Fe1-Somatropina, que en comparación con los 22-kD-hGH con 191 aminoácidos le falta el primer aminoácido (N-terminal) [31].
A continuación, la cromatografía de fase inversa SDSPAGE y el IEF proporcionaron referencias inequívocas sobre el desmantelamiento proteolítico y otros productos de desmantelamiento de proteínas.
A través de la desamidificación y la s-oxidación de la cadena lateral de aminoácidos, tales productos pueden surgir, generalmente con un almacenamiento inadecuado.
En la prueba, la solicitud de la monografía del libro de medicina sobre las proteínas relacionadas y en el IEF-compuestos de prueba no se completó.
Sin embargo, el hecho de que la proteína 20 kD-hGH faltara en las pruebas de extracto cadavérico de la hipófisis permitió concluir que las muestras examinadas (años 1996 a 1998) no se referían a ningún material fabricado a partir de la hipófisis humana, sino que, con gran probabilidad, se producía genéticamente.
Recientemente, se enviaron muestras de Somatogenum al laboratorio para su análisis mediante electro-spray-espectrometría de masas (Fig. 4).
Las muestras fueron fechadas en 1999 y dieron un resultado que también apuntaba al agente activo des-Phe1-Somatropina producido genéticamente.
En la sustancia de referencia (SRC), se determinó mediante la espectrometría de masas ESI que la masa molecular media era de 22125,8 ± 0,5 D, lo que concuerda muy bien con la secuencia de aminoácidos de los dos puentes de disulfuro intermolecular calculada con un valor de expectativa de 22125 D.
La muestra “Somatogenum” había vuelto a producir una señal con una masa claramente inferior 21978,1 ± 0,3 D, (diferencia medida: ca.147 D), de nuevo como se esperaría para un des-Phe1-Somatropina.
Con una prueba adicional a través del mapeo de péptidos o HPLC de fase inversa, el material se hizo más claro.
A diferencia de las muestras examinadas en los años anteriores con la etiqueta “Somatogenum”, los resultados de las pruebas de pureza se verificaron mediante IEF y SDS-PAGE y se compararon con la SRC de la somatropina, y tanto en el IEF como en la SDS-PAGE la muestra mostró sólo los volúmenes principales en el área medida de pH y/o molecular esperada.
No se hizo referencia a los productos de desmantelamiento de las proteínas. Obviamente se demostró que la muestra examinada contenía una sustancia química limpia y sin descomponer.
Corpormon® es un producto GH producido por Nikken Japón. El análisis de dos muestras encontradas en el mercado negro falló en la prueba de identidad cuando se comparó con Somatropin por medio de HPLC de fase inversa.
En lugar de los picos con un tiempo de retención esperado de unos 30 minutos, se observaron varios picos en tiempos de retención muy cortos, después de 5 a 8 minutos.
Una búsqueda en Internet sobre Corpormon en la escena del fisicoculturismo mostró que el preparado está frecuentemente disponible en el mercado negro, y se sospecha que es una falsificación que contiene hCG en lugar de somatropina recombinante.
Esta sospecha fue confirmada en las muestras examinadas aquí. Una prueba de embarazo convencional realizada en el adelgazamiento correspondiente a la prueba inmunológica altamente selectiva por hCG fue positiva en ambas muestras. El resultado se confirmó a través de SDS-PAGE.
Ambas muestras de Corpormon dieron volúmenes característicos para el alfa y la unidad inferior de hCG.
a) Las condiciones cromatográficas seleccionadas para la sustancia de referencia mostraron que el pico debía esperarse después de unos 30 min.
b) En el caso de Corpormon 4UI este pico faltaba. En cambio, varios picos se produjeron en tiempos de retención muy cortos de 5 a 8 min.
c) Un preparado que contenía hCG examinado retroactivamente también mostró un pico en unos 5 min.
Riesgos por falta de autorización de la UE o falsificación
Todas las muestras previamente examinadas con la etiqueta “Somatógeno/Somatógeno” contenían el agente activo des-Phe1 somatropina.
Los preparados con este agente activo deben clasificarse como genéticamente hechos, pero de primera generación de tales productos, comparables a la Met-Somatropina (somatrem).
Como medicamentos producidos genéticamente, podrían ser permitidos dentro de la UE, de forma centralizada y obligatoria por encima de la autoridad europea de autorización de la EMEA en Londres.
Pero como no existe una autorización correspondiente, los preparados con el agente activo de Phe1-Somatropina no se utilizan actualmente en la UE.
En Lituania y en algunos otros países de Europa oriental se ha registrado un medicamento de la etiqueta “Somatogenum- L 4 UI” de la empresa Biofa, que contiene des-Phe1-Somatropina, para el tratamiento de las interferencias del crecimiento [34].
Por lo tanto, en los productos que se encuentran en el mercado negro con la etiqueta “Somatogenum”, podría tratarse de productos originales procedentes de países de Europa oriental o de falsificaciones. No se realizó una prueba de seguridad, eficacia e identidad dentro de la UE.
Dado que no se revelan las condiciones de fabricación, no puede excluirse el riesgo de infección por posible contaminación con gérmenes patógenos.
En Japón (pero no en la UE), se permite un medicamento terminado con la etiqueta “Corpormon 4UI” de la firma Nikken con des- Phe1 somatropina producida genéticamente como agente activo.
En las muestras examinadas aquí con la etiqueta “Corpormon”, obviamente examinamos falsificaciones que contenían la hormona del embarazo hCG. Una muestra fue enviada para su análisis, que contenía en el frasco el texto “COMATOTPOHNH”, Fa. Endokrininai”.
Después del enfoque isoeléctrico, varios picos intensos en el área de pH de 4,6 a 5,2 aparecieron en la muestra examinada, junto a los principales picos en el pH-5,2.
En la sustancia de comparación más antigua (BRP) hecha de pituitarias cadavéricas, también se observaron picos secundarios similares.
Los picos secundarios deben ser devueltos probablemente a la hidrólisis de la cadena lateral de asparagina y glutamina de la proteína a las correspondientes formas desamidas.
Mediante la transformación de los grupos de acidamida en grupos de carbonato, el punto isoeléctrico de la proteína se desplaza hacia la zona ácida.
Los puntos de ataque preferidos para el desmantelamiento hidrolítico son los grupos de acidamidas expuestos de la asparagina en la posición 149 y 152 de la cadena de polipéptidos [32, 33].
Por lo tanto, la demanda de la monografía del libro de medicina según los picos secundarios con una intensidad no superior al 6,25% de la intensidad de los volúmenes de cabeza puede aparecer, no se cumplió en la preparación analizada.
En la prueba sobre sustancias afines mediante HPLC de fase inversa, se observó un pico en el tiempo de retención de la somatropina, pero también se produjeron varios picos secundarios intensos con tiempos de retención más cortos.
La petición de pureza de la monografía del libro de medicina no se cumplió (suma de las áreas de los picos secundarios <13%) para esta muestra.
Por medio de la espectrometría de masas, el agente activo somatropina pudo probarse sin ambigüedades mediante la detección por espectrometría de masas del ión de la molécula en la masa esperada a 22.125 D en la muestra.
Las señales intensivas adicionales observadas en 22.224 D y en 22.322 D y el espectro medido totalmente sucio se refirieron a la contaminación a través de las proteínas acompañantes y los productos de descomposición.
En el análisis a través de la electroforesis de SDS-Poliacrilamida, la muestra mostró claramente numerosos volúmenes adicionales junto a los volúmenes de cabeza en 22 kD y a. en 20 kD y 44 kD.
El modelo de la contaminación proteínica era muy similar al de la sustancia de comparación (BRP), hecha de material pituitario cadavérico.
La presencia de esos volúmenes de 20 kD en la muestra demostró que se trataba de una preparación de hormona de crecimiento hecha de pituitarias humanas, ¡no de rHGH sintética!
La hormona de crecimiento chino
En enero de 2003 se ofreció una ampolla de Ansomone® al organismo oficial holandés de lucha contra el dopaje para su análisis.
Resultó que la ampolla contenía Met-hGH o Nmetionyl- hGH (somatrem; la variante de 192 aminoácidos del hGH), en lugar de la secuencia correcta de 191 aminoácidos rhGH que estaba etiquetada para contener.
El productor farmacéutico Anhui Anke Biotechnology cuenta una historia totalmente diferente en su sitio web.
Según el productor chino, llamado AnkeBio, “Ansome es un compuesto producido por bacterias modificadas, que es 100% igual a la hormona de crecimiento hecha en los humanos: la somatropina”.
El laboratorio descubrió que la dosis de somatrem estaba bien, y que no poseía mucha proteína que pudiera contaminar el preparado.
No hay ninguna farmacia de baño para ese asunto [47], aunque no es exactamente lo que estás pagando.
Pedimos a AnkeBio una reacción sobre este artículo, y declararon que era sólo un rumor, y que su rhGH era tan bueno como cualquier otra marca. GenLei nos dijo que se hicieron análisis similares en China, y que tuvieron los mismos resultados.
Genescience Jintropin® se fabrica con tecnología de secreción. Genescience lo produce específicamente a través de la tecnología de secreción del Dr. Jin, de ahí el nombre de Jintropin.
Esta tecnología de secreción está patentada en China por Genescience, por lo que otros fabricantes chinos no pueden usar esta tecnología para producir rhGH, a pesar de sus muchas ventajas.
En agosto de 2004 GeneScience cambió el diseño de Jintropin.los viales de 10 iu tienen una tapa amarilla con “Jintropin 10 iu” dentado en el plástico.lo mismo ocurre con los 4 viales de iu, pero tienen una tapa verde.
En esa fecha, los viejos hologramas fueron reemplazados por pegatinas de seguridad de la organización internacional de lucha contra la falsificación de Oriente.
Los fabricantes chinos a menudo utilizan distribuidores (oficiales), agentes de exportación o agentes de transporte para sacar sus productos del país. GenSci nos informó que debido a la gran cantidad de falsificaciones y falsificaciones sólo se exportarán directamente a los clientes a partir de ahora.
Según IMS-Health, GeneScience tiene un +75% de participación en el mercado de productos de GH en el mercado chino. Su marca se ha vuelto cada vez más popular, especialmente entre los culturistas que usan grandes cantidades, y encuentran el favor en su excelente calidad y bajo precio.
No es de extrañar que cada vez más proveedores y falsificadores quieran intentar llevarse un pedazo del pastel. Las primeras falsificaciones de cualquier marca conocida son siempre recordadas en una naturaleza notoria.
Con Gene-Science, esto sucedió con frascos que llevaban tapas verdes y etiquetas de papel, con letras chinas y el número de lote 20020515.
La falsificación es un tema que GeneScience trató de evitar en nuestra conversación. Ellos admiten que este crimen es un factor creciente en el mercado.
Una “falsificación” se ve exactamente como la caja de Jintropin, y los agentes chinos la venden como un producto más barato hecho en secreto por la verdadera compañía de GeneScience (llamada Genitropin de ProGeni).
GeneScience nos envió un correo negando esto, y declarando que tal política sería perjudicial para la imagen y calidad de su producto.
International Pharmaceuticals (IP China) afirma en su sitio web que vende somatropina, “HGH sintética alias rhGH, hemos pedido especialmente la producción de 191 versión de aminoácidos, al igual que Humatrope y Saizen, que es un duplicado exacto de los propios cuerpos, garantizado contra cualquier prueba de laboratorio, viales etiquetados con el lote # y la fecha de caducidad, es de marca y la producción regulada por la SDA china (equivalente de la US-FDA), sin embargo la fábrica nos pidió que no reveláramos el nombre de la marca…”
Claro, y la Tierra es plana.
Fitropin® es otra marca china de GH que se anuncia en los foros de culturismo. Está hecha por la empresa farmacéutica Kexing.
Fitropin es otro producto chino de GH que se hace usando tecnología de inclusión corporal. El fabricante revela abiertamente el hecho de que venden somatrem en lugar de somatropina, por lo que no es un punto de queja con el fabricante.
Debido a que todos los fabricantes chinos de rhGH (Kexing- United etc.) excepto GeneScience (Jintropin) todavía usan la tecnología de inclusión corporal, es muy posible que todos ellos sólo compren de un único gran fabricante.
Otros productos de GH falsos / Resultados de los análisis
En enero de 2003 se analizó el compuesto de la hormona de crecimiento Somatohorm® en un vial a través de Ergogenics.
No contenía hormona de crecimiento, sino una sustancia que causaba un dolor violento después de la inyección.
La razón se hizo evidente después del análisis de un laboratorio acreditado. Los científicos buscaron primero en la muestra trozos de péptidos entre 5 y los 220 kilo daltones.
Como no encontraron ninguno, eso excluyó que la ampolla contuviera los 4 IU de GH correctos. Este análisis se realizó utilizando SDS-PAGE y LC-MS.
Debido a que el propietario del compuesto había sufrido un dolor violento después de la inyección, los científicos buscaron en la ampolla más sustancias toxicológicas.
Con el método Hplc-DAD descubrieron que la ampolla contenía un derivado de la tiamina, que en una investigación más cercana con LC-MS resultó ser tiaminedifosfato, un derivado de la vitamina B1 que no es apto para ser inyectado.
La cantidad valorada se estimó en 25 miligramos por ampolla. Debido a que los científicos ya habían realizado algunos análisis con la ampolla no pudieron determinar la calidad exacta.
Esa vitamina alternativa se produjo como un subproducto/contaminante de la tecnología de inclusión corporal, y estaba causando dolor en la inyección.
Cuando se disuelve en agua, el tiaminedifosfato reduce el pH. Tres miligramos de esta sustancia en 1 mililitro de agua provocan que disminuya el pH a 2,2.
El portador de la inyección, tanto si se quiere inyectar subcutáneamente (bajo la piel) o intramuscularmente (en el músculo), debe tener un valor de Ph entre 4 y 9.
En otros valores las inyecciones son dolorosas y el tejido alrededor del punto de la aguja puede morir (necrosis). La ampolla examinada procedía de Polonia.
Últimamente Somatohorm® viene en su mayoría de la República Checa [47]. Esta no es la primera vez que se ha visto la falsificación de Somatohorm®.
La organización mundial de la salud OMS informó también sobre la falsificación de Somatohorm® entre 1999 y 2000.
Al parecer, esas falsificaciones no contenían sustancias activas, según los análisis realizados.
Durante el mismo período, la OMS informó de una ampolla de Serostim que no era válida ni siquiera para el ojo, y una falsa ampolla de Breeza Tech®’ era una hormona de crecimiento humano que no contenía somatropina, sino en realidad la metionil somatotropina equina veterinaria [46]
. En abril de 2004 se encontró un falso Serostim® con los números de lote MNK612A y MNH605A y una fecha de caducidad del 08/02.
Aunque la droga real tiene el mismo número de lote, su fecha de caducidad correcta debería ser el 08/01. Vino en un kit con ocho ampollas, y costó 150 dólares cada una. El productor del Serostim falsificado no era un desconocido para la policía, y ya había vendido esteroides anabólicos androgénicos desde 1995.
En su casa de Mason, Iowa, la policía encontró cuatrocientos mil dólares en efectivo, y dijo que había suministrado hormona de crecimiento desde 2001. La policía también recuperó un suministro de dos mil cajas, con un valor en la calle de cuatrocientos mil dólares.
El análisis preliminar de este lote falsificado por la FDA indica que contenía 1 mg de rhGH en lugar de los 6 mg etiquetados. ¡Este producto era tan atractivo que incluso llegó a los estantes de la farmacia! [49].
En agosto de 2001 el laboratorio forense de la FDA examinó siete viales de Nutropin AQ® falsificado, y encontró que el lote número L9101A4 y L9043A4 contenía insulina humana.
Los viales de muestra del lote falsificado número L9504A2 y L9504A3 no contenían ningún ingrediente activo.
La Oficina Nacional de Investigación de Finlandia había advertido durante la Navidad de 2002 acerca de la falsificación de Genotropin®.
La razón fue una redada en una casa de dopaje que tuvo lugar a mediados de diciembre.
En esas redadas, los agentes de Jyväskylä encontraron un par de ampollas falsas de hormona de crecimiento [48].
En una investigación más cercana, parecía que las ampollas eran de hecho ampollas originales de Caverject.
Los falsificadores las cubrieron con nuevas etiquetas. La oficina nacional sospecha que en el mercado negro circulan más ampollas falsificadas de Genotropin que de hecho contienen Caverject. Genotropin® es veinte veces más caro que Caverject, así que podemos entender los motivos financieros.
El principio activo de Caverject es la prostaglandina E1. Los hombres impotentes se la inyectan en el pene para provocar una erección. Después de la inyección se desarrolla una sensación de ardor alrededor del punto de la aguja.
Referencias:
[1] Brown P., Preece M.A. and Will R.G.: “Friendly fire” in medicine: hormones, homografts, and Creutzfeldt-Jakob disease.Lancet 340, 24 – 27 (1992).
[2] Billette de Villemeur T. et al.:Creutzfeldt- Jakob disease from contaminated growth hormone extracts in France.Neurology 47, 690 – 695 (1996).
[3] Huillard d’Aignaux J. et al.: Incubation period of Creutzfeldt-Jakob disease in human growth hormone recipients in France.Neurology 53, 1197 – 1201 (1999).
[4] Brown P. et al.: Iatrogenic Creutzfeldt- Jakob disease at the millennium.Neurology 55, 1075 – 1081 (2001).
[5] Ministerium für Arbeit,Gesundheit und Soziales NRW: Warnung vor gefährlichen illegalen Arzneimitteln. Pressemitteilung, 26. Februar 1997.
[6] Bayerisches Staatsministerium für Gesundheit, Ernährung und Verbraucherschutz: Warnung vor illegal erworbenen Wachstumshormonen aus Osteuropa. Pressemitteilung Nr. 64, 5. März 2001.
[7] N.N.: Vor Fälschungen wird gewarnt. Dtsch.Apoth. Ztg.141,1652 – 1656 (2001).
[8] N.N.: Infektionen durch Doping. Der Spiegel (17), 17 (2001).
[9] Ministerium für Soziales, Familie und Gesundheit Thüringen:Akute Gefährdung durch Hormonprodukte.Pressemitteilung, 10. Juli 2002.
[10] Dingermann T.:Gentechnik,Biotechnik: Prinzipien und Anwendungen in der Pharmazie, 387 – 403.Wissenschaftliche Verlagsgesellschaft, Stuttgart 1999
[11] DeNoto F.M.,Moore D.D. and Goodman H.M.:Human growth hormone DNA sequence and structure: possible alternative splicing.Nucleic Acids Res. 9, 3719 – 3731 (1981).
[12] Chapman G.E. et al.: The 20,000 molecular weight variant of human growth hormone. J. Biol. Chem. 256, 2395 – 2401 (1981).
[13] SWISS-PROT: Somatotropin P01241, 2002.www.expasy.org/sprot.
[14] de Vos A.M.,Ultsch M.and Kossiakoff A.A.: Human growth hormone and extracellular domain of its receptor. Science 255, 306 – 312 (1992).
[15] Argetsinger L.S. et al.: Identification of JAK2 as a growth hormone receptor-associated tyrosine kinase. Cell 74, 237 – 244 (1993).
[16] Cunningham B.C. et al.:Dimerization of the extracellular domain of the human growth hormone receptor by a single hormone molecule.Science 254,821 – 825 (1991).
[17] N.N.:Vorläufiger Rückzug eines Wachstumshormons. arzneitelegramm (5), 39 (1985).
[18] N.N.: Doping. Im Trend: Anabolika- Mix mit Wachstumshormon.Dtsch.Apoth. Ztg. 133, 980 (1993).
[19] Rauscher M. und Korte S.: Wachstumshormone – STH,IGF und Insulin. ISPVerlag, Arnsberg 2000.
[20] Dubbels W.:“Saubere Spiele”in Sydney? Dtsch.Apoth. Ztg. 140, 5435 – 5437 (2000).
[21] Schänzer W.: Dopingkontrollen und aktueller Stand der Nachweismethoden. Dtsch. Z. Sportmed. 51, 260 – 266 (2000).
[22] Wu Z. et al.: Detection of doping with human growth hormone. The Lancet 353, 895 (1999).
[23] Boos C. et al.: Medikamentenmißbrauch beim Freizeitsportler im Fitneßbereich. Dtsch.Ärztebl.95,953-957 (1998).
[24] Oldenburg A.: Fountain of youth flows from the needle.To fight the onslaught of age, baby boomers with big bucks inject human growth hormone every day. USA Today 11/14/00 (2000). www.usatoday. com/life/health/alternative/lhalt013.htm.
[25] Lerchl A., Jockenhövel F.und Allolio B.: Hormone gegen das Altern – Möglichkeiten und Grenzen. Dtsch. Ärztebl. 98, A-2041 (2001).
[26] Koch E.:ZDF-Reportage “Die Anabolika- Connection”, gesendet im Juni 2000.
[27] Bangham D.R., Gaines Das R.E. and Schulster D.:The international standard for human growth hormone for bioassay: calibration and characterization by international collaborative study. Mol. Cell. Endocrinol. 42, 269 – 282 (1983).
[28] Europäisches Arzneibuch: Monographien Somatropin“, Somatropin zur Injektion” und “Somatropin-Lösung zur Herstellung von Zubereitungen”, in Europäisches Arzneibuch Nachtrag 2001, Amtliche deutsche Ausgabe. Deutscher Apotheker Verlag, Stuttgart 2001.
[29] Riggin R.M.,Dorulla G.K. and Miner D.J.:A reversedphase high-performance liquid chromatographic method for characterization of biosynthetic human growth hormone. Anal. Biochem. 167, 199 – 209 (1987).
[30] Lämmli U.K.: Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature 227, 680 – 685 (1970).
[31] Charton A. et al.: A somatropin counterfeit challenging the European Pharmacopeia monograph. Pharm. Pharmacol. Commun. 5, 61 – 66 (1999).
[32] Cholewinski M.,Lückel B.and Horn H.: Degradation pathways, analytical characterization and formulation strategies of a peptide and a protein. Calcitonine and human growth hormone in comparison. Pharm.Acta Helv. 71, 405 – 419 (1996).
[33] Frenz J.,Wu S.L. and Hancock W.S.: Characterization of human growth hormone by capillary electrophoresis. J.Chromatogr. 480, 379 – 391 (1989).
[34] Mitteilung des staatlichen Arzneimittelkontrollamtes der Republik Litauen zum Zulassungsstatus des Präparates “Somatogenum- L”, 1997.
[35] Hildebrand J.R.: Arzneimittelfälschungen in den USA.Pharm. Ind.64, 147 – 150 (2002).
[36] Serono Inc.: Serono statement regarding counterfeit Serostim®, January 22, 2001. www.seronousa.com/frame_news.html?arch ive.html.
[37] N.N.:Wachstumshormon-Präparate: Arzneimittelfälschungen in Bodybuilder- Szene. Dtsch.Apoth. Ztg.133, 2402 (1993).
[38].Schludi H.,Wolferseder E.und Zeitler K.: Arzneimittelfälschungen Dtsch.Apoth. Ztg. 140, 4971 – 4978 (2000).
[39]. Jung F., Scherges M.und Fürst P.: Illegale und gefälschte Wachstums-hormonpräparate. Dtsch.Apoth. Ztg. 142, 50 – 61 (2002).
[40].Ansomone.Recombinant Human Growth Hormone for Injection (rHGH, rDNA Orgin).M Ankebio.com 2002
[41].Girard F.Gourmelen M.:Clinical experience with Somatonorm. Acta Paediatr Scand Suppl 1986;325:29-32.
[42]. Milner R.D. Clinical expirience of somatrem: U.K. preliminary report. Acta Paediatr Scand Suppl 1986;325:25-8
[43]. Pitukcheewawont P, Schwarzbach L, Kaufmann Fr. Resumption of growth after methionyl-free human growth hormone therapy in a patient with neutralizing antibodies to methionyl human growth hormone. J Pediatr Endocrinol Metab 2002 May; 15(5):653
[44]. Jones A.J, Department of Analytical Chemistry,Genentech Inc,South San Francisco, CA 94080, USA.
[45].Massa G,Vanderschueren-Lodeweyckx M,Bouillon R.:five-year follow-up of growth hormone antibodies in growth hormone deficient children treated with earlier with recombinant human growth hormone:Clin Endocrinol (Oxf).1993 Feb;38(2):137-42.
[46].WHO Pharmaceuticals Newsletter, No.3, 2000.Counterfeit drugs:Data collection and the Liaison Officers network
[47].www.ergogenics.org
[48]Black market hormone was really impotence drug. Helsingin Sanomat, 31- 1-2003
[49].//www.fda.gov/ola/2002/drugimportation0725. html
